大腸桿菌使用超聲波破碎儀進(jìn)行操作的效果如何

　　大腸桿菌表達(dá)外源蛋白，在超聲破碎的時(shí)候用超聲波破碎儀便能起到很好的效果，對(duì)其他的一些細(xì)菌同樣起作用，比如鏈霉菌，下面來(lái)詳細(xì)的了解一下吧。

　　細(xì)菌沉淀直接加樣品進(jìn)行混勻、離心、煮沸后直接上樣，染色脫色步驟如下：將膠放入適量的染色液微波爐里加熱，將染色液換成大量的水在微波爐煮就可以了。在表達(dá)重組蛋白后超聲波破碎細(xì)胞，采用冰浴 ，但是不一會(huì)就會(huì)產(chǎn)生大量泡沫，影響了破碎功率。
　　
　　在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中若產(chǎn)生氣泡是因?yàn)樘筋^位置沒(méi)有放好，探頭一定要接近底部，約1cm。功率根據(jù)儀器不同也會(huì)有所不同，因此可以觀察液面，注意有波動(dòng)但不要太劇烈機(jī)好。變幅桿位置擺放也要注意，聽(tīng)聲音如果不對(duì)的話就要及時(shí)調(diào)整，另外可以從菌濃度方面考慮。在破碎時(shí)試著加大體積，強(qiáng)度不要超過(guò)60%。
　　
　　嘗試超8秒，對(duì)有些菌體蛋白來(lái)說(shuō)，很難散熱，導(dǎo)致蛋白變性產(chǎn)生氣泡，因此停留的時(shí)間要稍長(zhǎng)一點(diǎn)，這種情況多見(jiàn)于包涵體形式的蛋白。
　　
　　使用超聲波破碎儀在做大腸柑橘超聲時(shí)，采用400W，超5停5的方法，效果不錯(cuò)，但是用在鏈霉菌上，似乎沒(méi)有什么效果，可能死由于細(xì)胞壁組成差異造成的，因?yàn)榇竽c桿菌屬于革蘭氏陰性菌的。

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